Анализ на цереброспиналната течност (CSF)

CSF (гръбначно-мозъчна или гръбначно-мозъчната течност CSF)

Гръбначно-мозъчната течност (CSF) е оформен в хороидалния плексус на мозъчните вентрикули на. При възрастни subarhnoidalnyh пространства човешки едновременно и циркулира в вентрикулите на мозъка на 110-160 мл CSF, в гръбначния канал - 50-70 мл. Алкохол се образува непрекъснато със скорост 0,2-0,8 мл / мин, в зависимост от вътречерепно налягане. При здрав човек ден формира 350-1150 мл CSF.

В разтвор, получен чрез пункция на гръбначния канал, по-често - лумбалните - съгласно методите, добре известни невролози и неврохирурзи. Първите му капки се отстраняват ( "път" на кръвта). След това течността се събира най-малко две тръби: тръба по конвенционален (химически, центрофуга) за общо клинично и химически анализ, стерилна - за бактериологично изследване. Във формуляра за сезиране на лекаря за изследване на CSF трябва да посочи не само името на пациента, но и клиничната диагноза и целта на изследването.

Трябва да се помни, че доставени проби лабораторни алкохол трябва да бъдат защитени от pergrevaniya или охлажда и проби за откриване на бактериални полизахариди serogicheskih тестове трябва да се загрява на водна баня в продължение на 3 минути.

Жилищна лабораторно тестване на цереброспинална течност (аналитичната фаза) се извършва в съответствие с правилата, приети в клиничната лаборатория в анализа на всички биологични течности, и включва следните етапи:

- макроскопичния анализ - оценка на физико-химични свойства (размер, цвят, характер)
- преброяване на броя на клетките,
- Микроскопия родния подготовка и цитология оцветен preparata-
- биохимични изследвания,
- микробиологично изследване (ако е посочено).

Ние считаме, че е подходящо и информативен в някои случаи допълват изследването на CSF имунологични и евентуално - други тестове, значението на който ще бъде разгледан в литературата.

Декодирането изпълнение на CSF

Нормално безцветно CSF и porozrachna (като дестилирана вода, в сравнение с който физическите свойства обикновено описват CSF).

Грей или сиво-зелена течност обикновено се причинява от смес от бактерии и левкоцити. Червената CSF различна интензивност (eritrohromiya) задвижва от смес от еритроцити, настъпващи в прясно или кръвоизлив на мозъка нараняване. Визуално pristutstvuyut еритроцитите се открива, когато съдържание на повече от 500-600 микролитра.

В патологични процеси може да бъде течност ksantohromnoy - оцветен в жълто или жълто-кафяви продукти от повреда хемоглобин. Имайте предвид и xanthosis фалшива - цвят ликьор, причинени от наркотиците. По-рядко се срещаме зеленикаво CSF (гноен менингит, мозъчен абсцес). Литературата описва цвета и korchnevy течност - на пробив краниофарингиом кисти в цереброспиналната течност пътя.

Мътността на алкохол може да се дължи на примеси кръвни клетки или микроорганизми. В последния случай, мътността може да бъде отстранен чрез центрофугиране. Когато съдържанието в CSF увеличено количество груби протеини става мътен.

Относителната плътност на цереброспиналната течност, получена чрез лумбална пункция, 1,006-1,007. Когато възпаление на менингите, мозъчна травма относителната плътност на цереброспиналната течност се увеличава до 1015. Това намалява с свръхпродукция на цереброспинална течност (хидроцефалия).

При повишени нива на фибриноген в CSF се образува фибринозен филм или съсирек, който се появява по-често при туберкулозен менингит. Понякога тръбата с течност се оставя при стайна температура в продължение на един ден (ако е необходимо точно да се определят - Да филм образуван). В присъствието на фибринозен си филм дисекция игла се пренася върху предметно стъкло и се оцветяват с Ziehl-Neelsen или друг метод за идентифициране на микобактерии. Нормално CSF 98-99% вода.

Въпреки това, изследването на неговия химичен състав е важна задача. Тя включва определяне на нивото на протеин, глюкоза и хлорид и се допълва с други показатели в редица случаи.

Протеинът в цереброспиналната течност

Повече от 80% от CSF протеини от плазмата потоци чрез ултрафилтрация. Съдържанието на протеин от нормата в различни части: камерна - 0,05-0,15 г / л, cisternal 0.15-0.25 г / л, лумбална 0.15-0.35 г / л. За да се определи концентрацията на протеин в гръбначно-мозъчната течност може да се използва всеки от стандартните методи (с сулфосалицилова киселина и амониев сулфат и други). Повишеното съдържание на протеини в гръбначномозъчната течност (giperproteinarhiya) може да се дължи на различни патогенетични фактори (Таблица 1).

Изследването на CSF протеин дава възможност не само за изясняване същността на патологичния процес, но също така да се оцени състоянието на кръвно-мозъчната бариера. Индикатор за тези цели може да бъде албумин, при условие, че нивото в CSF се определя чрез имунохимични методи. Определяне на албумин се извършва във връзка с факта, че, като кръв протеин не се синтезира локално и следователно може да бъде "маркер" имуноглобулини инфилтрирани от притока на кръв поради нарушена пропускливост бариера. Едновременно определяне на албумин в серума (плазма) кръв и CSF албумин ни позволява за изчисляване на индекса:

Когато интактна кръвно-мозъчната бариера, този индекс е по-малко от 9, с умерено увреждане - 9-14, със забележим - 14-30, с тежко увреждане - 30-100, и увеличение с повече от 100 показва пълна липса на бариерата.

През последните години, повишен интерес, специфични за CNS протеини алкохол - неврон енолаза, S-100 протеин, базичен протеин на миелина (МВР) и други. Един от най-обещаващите от тях за клинични цели изглежда МВР. В нормалния CSF е практически отсъства (неговата концентрация не надвишава 4 мг / л) и се появява само при патологични състояния. Тази функция не е лаборатория за дадено клинични единици, но отразява степента на увреждане (най-вече свързани с унищожаването на бяло твърдо вещество). Някои автори го обещаващ определение на МВР в CSF за мониторинг neuroAIDS разгледа. За съжаление, днес все още има проблеми, свързани с прякото определяне на концентрацията на протеина.

Глюкоза в CSF

Глюкозата се намира в нормални цереброспинална течност при концентрация 2.00-4.18 ммол / л. Тази стойност е предмет на значителни колебания дори при здрави хора, в зависимост от режима на хранене, физическата активност и други фактори. Точната оценка на нивата на глюкоза в цереброспиналната течност за едновременно определяне на нивото му в кръвта, където обикновено е 2 пъти по-високи. Повишени нива на глюкоза в кръвта (giperglikoarhiya) се среща в захарен диабет, остър енцефалит, исхемични заболявания на кръвообращението и други заболявания. Gipoglikoarhiya вижда с менингит на различни етиологии или асептично възпаление, неопластични лезии на мозъка и на мембраните, най-малко - с инфекция херпес, субарахноидален кръвоизлив.

Някои предимство пред глюкоза като диагностичен маркер е лактат (млечна киселина) като неговата концентрация в цереброспиналната течност (1.2-2.1 ммол / л) е независим от този в кръвта. Нейното ниво е значително увеличена в различни състояния, свързани с нарушена енергийния метаболизъм - менингит, особено - причинени от Грам-положителни флора, мозъчна хипоксия и някои други.

Хлориди в цереброспиналната течност

Хлориди - съдържание в нормална цереброспинална течност - 118-132 ммол / л. Повишената концентрация в CSF се наблюдава в нарушение на тяхното отстраняване от тялото (бъбрек, сърце), в дегенеративни заболявания и тумори на централната нервна система. Намаляване на съдържанието на хлорид е маркиран с енцефалит и менингит.

Ензими в цереброспиналната течност

Алкохол се характеризира с ниска активност на ензимите, които се съдържат в него. Промяна на ензимна активност в CSF в различни заболявания обикновено са неспецифични и паралелно описаните промени в кръвта в тези заболявания (Таблица 2). Различен подход заслужава интерпретация на промените в активността на креатин фосфокиназа (СРК). Този ензим в тъканите на три фракции, които се характеризират не само от молекулни различия, но и естеството на разпределението в тъканите: CK-MB (миокарда), CK-ММ (мускул), CK-BB (мозъка). Ако общата активност на СК в CSF не основния диагностична стойност (тя може да бъде увеличена, когато тумор, мозъчен инфаркт, епилепсия и други заболявания), фракцията на СК-BB е относително специфичен маркер на повреден мозъчна тъкан и неговата активност в CSF корелира с мащаб Глазгоу.

Броят на клетките и цереброспиналната течност cytogram

В изследване на биологични течности и CSF включително обикновено разчита на броя на клетките в cytogram и намазки оцветени azureozinom (Romanowsky-Giemsa Nocht, Pappenheim). Преброяване на клетъчни елементи в цереброспиналната течност (определяне cytosis), произведени с помощта на Fuchs-Rosenthal камера, тя предварително отглеждане Самсон реагент 10 пъти. Използване само на дадена боя, отколкото всеки друг. Тя позволява на клетките да се оцветяват в продължение на 15 мин и клетките запазват непроменени за 2 часа.

Броят на клетките в рамките на клетката се дели на три Така полученият cytosis в 1 ул. За по-голяма точност, вземете под внимание броя на клетките в три камери. Когато Fuchs-Rosenthal камера отсъствие Goryaeva да използвате камерата, чрез преброяване на клетки в мрежата и в трите камери, резултатът се умножава по 0.4. Досега има несъответствия в единици на броя на клетките - броят на клетки в камера, в 1 mm или 1 литър. Вероятно, че е целесъобразно все пак да изразя броя на клетките в cytosis микролитра. За изчисляване на броя на белите кръвни клетки и червените кръвни клетки в CSF може да се използва и автоматизирани системи.

Повишено съдържание на клетки в CSF (плеоцитоза) се появява често при възпалителни заболявания, по-малка степен - с менингеална дразнене. Най-виден плеоцитоза вижда с бактериални инфекции, гъбични мозъчни лезии и туберкулоза менингит. При епилепсия арахноидит, хидроцефалия, дегенеративни процеси, както и някои други заболявания на броя на централната нервна система клетка остава нормално.

Оцветяването на клетките нативен препарат реагент Самсон позволява достатъчно надеждно диференцирани клетки. Но по-точни техните морфологични характеристики, постигнати след фиксиране и оцветяване на цитологични препарати, приготвени. Модерният подход към подготовката на такива продукти е свързано с използването на цитоспинния. Въпреки това, дори и в Съединените щати, те имат само 55% от лаборатории. Поради това, на практика, много по-лесен начин - отлагането на клетки върху предметно стъкло. Препаратите трябва да бъдат добре изсушават на въздуха, а след това латекс.

Оцветените образеца са броя на клетките елементи. Те са представени главно от кръвни клетки (обикновено - лимфоцити и неутрофили, най-малко - моноцити, еозинофили, базофили) може да отговори на плазмените и мастни клетки, макрофаги, зърнести топки (дегенеративно формата специален тип макрофаг - lipofagov състояние на мастна дегенерация), клетки arahnoendoteliya, epindimy , Морфологията на тези клетъчни елементи обикновено са добре известни на лекарите и лабораторна диагностика е описано подробно в много учебници. Степента и естеството на CSF на cytogram плеоцитоза позволява да се уточни естеството на патологичния процес (Таблица 3).

Левкоцитоза често придружени от остра инфекция (местно и дифузно менингит). CSF еозинофилия е рядко - когато мозъка на ехинококозата, еозинофилен менингит. CSF еозинофилия не корелира като правило с броя на еозинофилите в кръвта. Лимфоцитна плеоцитоза CSF се среща в вирусен менингит, множествена склероза, хронична фаза на туберкулозен менингит след операции на мозъчни мембрани. В патологични процеси на ЦНС наблюдавани полиморфизъм на лимфоцити, сред които са активирани. Те се характеризират с присъствието на обилно цитоплазма с единични palely азурофилните гранули, някои клетки са otshnurovku или фрагментиране на цитоплазмата (clasmatosis). Плазмените клетки се появяват в cytogram в вирусен или бактериален менингит, подостри възпалителни процеси, по време на възстановяването от невросифилис. Моноцитите, подложени на дегенерация в цереброспиналната течност бързо лимфоцити наблюдавани при множествена склероза, прогресивна паненцефалит, хронична тлеене възпаление. Макрофагите - "санитари" разтвор, показват с кръвоизливи, инфекции, травматични и исхемична некроза.

Понякога CSF открива анормални клетки - елементите, които от техните морфологични характеристики не могат да бъдат отнесени към специфични клетъчни видове. Атипични клетки са намерени в хронични възпалителни процеси (туберкулозен менингит, множествена склероза и т.н.), и често те са туморни клетки. Вероятност намира ракови клетки в цереброспиналната течност в мозъчни тумори е ниско (по-малко от 1.5%). Откриване на бластни клетки в CSF в хематологични злокачествени заболявания предполага neuroleukemia.

Анализът на състава на алкохол е важно да се оцени съотношението на протеини и клетъчни елементи (дисоциация). Когато клетката протеин дисоциация отбележи плеоцитоза изразено при нормално или леко повишено съдържание на протеин. Това е типично за менингит. Belkovokletochnaya дисоциация характеризиращ giperproteinarhiey при нормално cytosis. Това състояние е типично за процеси застой в цереброспиналната течност пътища (тумор, арахноидит и др.).

Клинични ситуации понякога изискват преброяване на броя на еритроцитите в кървава цереброспинална течност (за обем обективиране кръвоизлив). Броене на червени кръвни клетки са както в кръвта. Както е посочено по-горе, се променя цвета алкохол ако в 1 mm съдържа повече от 500-600 еритроцити забележимо оцветяване настъпва в присъствието на около 2000, и когато стане хеморагична ниво на еритроцитите на повече от 4000 / L.

Микробиологично изследване на цереброспиналната течност

Един от най-честите заболявания на централната нервна система е гноен менингит. В такива случаи, особено неотложни mikorobiologicheskoe проучване. Тя включва примерен тест - bacterioscopy наркотици и класически техники за култура. Bacterioscopy разтвор е ограничена диагностична стойност, по-специално при получаването на прозрачен CSF. Намазка получава от разтвор на утайката, получена чрез центрофугиране okarshivayut метиленово синьо или оцветяване по Грам, въпреки че някои автори считат, че последната версия на цвета "травматизирам" оформени елементи и създава артефакти. Когато намерени менингит и абсцеси разнообразна флора, съответстващи на естеството на заболяването. Независимо от резултатите от микроскопия на бактериален менингит диагноза трябва да бъде потвърдена от култура анализ, който се превръща в определящ фактор при диагностицирането на тази група от заболявания и избора на подходяща терапия. Тя се провежда в съответствие със Заповед № 375 на Министерството на здравеопазването на Руската федерация 23.12.98 "На мерки за засилване на наблюдението и предотвратяване на менингококова инфекция и гнойна бактериален менингит." Най-честата причина за бактериален менингит е грам-отрицателна Diplococcus Neisseria meningitidis, което е 80% от случаите може да се открие дори когато микроскопия.

CSF микроскопия

Обикновено, в цереброспиналната течност са налични само лимфоцити и моноцити. В различни заболявания и патологични състояния, в CSF могат да се появят и други видове клетки.

Лимфоцитите са подобни по размер на червени кръвни клетки. Лимфоцитите имат голям ядро ​​и тясна джанта на цитоплазма небоядисана. Обикновено, в цереброспиналната течност съдържа 8-10 лимфоцитни клетки. Техният брой се увеличава в тумори на централната нервна система. Лимфоцитите се срещат в хронични възпалителни процеси в черупките (туберкулозен менингит, арахноидит tsistitserkoznom).

Плазмените клетки в гръбначно-мозъчната течност. Клетките големи от лимфоцити, голям ядро, разположени ексцентрично, голямо количество цитоплазма с относително малък размер на ядра (размер клетка - 6.12 mm). Плазмените клетки в CSF са открити само в патологични случаи продължителността на настоящите възпалителни процеси в мозъка и на мембраните, с енцефалит, туберкулозен менингит, арахноидит tsistitserkoznom и други заболявания в постоперативния период, когато бавен заздравяване на рани.

Fabric моноцити в гръбначно-мозъчната течност. размер клетка - от 7 до 10 микрона. В една нормална течност понякога може да се случи, както единични бройки. Моноцитите се намират в цереброспиналната течност след операция на централната нервна система, с дълга настоящите възпалителни процеси в черупките. Наличието на тъкан моноцити казва за реакцията на активна тъкан и раната зараства нормално.

Макрофагите в гръбначно-мозъчната течност. Може да има ядра с различни форми, обикновено се намира в периферията на цитоплазмата на основните клетки съдържа вакуоли и включвания. В нормалните макрофагите ОСР не се случи. Наличието на макрофаги в нормалния брой клетки в CSF се наблюдава след кървене или възпаление. Обикновено те се срещат в постоперативния период, който има прогностично значение и говори за активност на пречистения разтвор.

Зърнеста топки в гръбначно-мозъчната течност. Клетки с мастна инфилтрация - с присъствието на макрофаги в цитоплазмата на мастните капчици. В оцветени препарати от гръбначномозъчната течност клетки имат малък периферно разположен ядрото и цитоплазмата груби. Стойността на клетката е различна и зависи от включените грес капчици. Гранулираните топки намерени в патологична течност, получена от мозъчни кисти в мозъчната тъкан огнища срив в тумори.

Неутрофилите в CSF. Камерата е идентичен във формата на неутрофили от периферна кръв. Наличието на неутрофили в CSF дори в минимални количества, или показва на първата, или като възпалителна реакция. Наличието на променени неутрофили показва затихването на възпалителния процес.

Еозинофилите в CSF. Определена в гръбначно-мозъчната течност на която има равномерно, лъскава зърно. Еозинофилите се срещат в субарахноидален кръвоизлив, менингит, туберкулоза и сифилитичен мозъчни тумори.

Епителни клетки в гръбначно-мозъчната течност. Епителни клетки, които ограничават субарахноидален пространство, са открити в гръбначно-мозъчната течност рядко. Тези големи кръгли клетки с малки кръгли или овални ядра. Се намират в тумори, понякога с възпалителни процеси.

Туморни клетки и комплекси в CSF. Те се намират в клетката и се оцветяват препарат алкохол. Злокачествени клетки могат да бъдат от следните видове тумори:

•  медулобластом;
•  spongioblastoma;
•  астроцитом
•  рак.

Кристалите в течност. Намерени в гръбначно-мозъчната течност рядко, ако тумор разпадане.

Елементи на Echinococcus в likvore- куки scolexes, хитин черупки фрагменти - в цереброспиналната течност са редки.

PCR диагностика алкохол

През последните години някои обещание в етиологични диагностика neuroinfections свързано с развитието на молекулярно-генетични техники за откриване на нуклеинови киселини от инфекциозни агенти в цереброспиналната течност (PCR диагностика).

По този начин, като течността е средно ясно отговаря на патологични процеси в централната нервна система. Дълбочината и характерът на промените му се дължат на дълбочината на патофизиологични нарушения. Правилно лабораторно изследване liquorologic симптоми помага за изясняване на диагнозата и да се оцени ефективността на лечението.