Лечението на хронични ваксини херпесни инфекции на базата на IFN-индуциран дендритни клетки

Един от най-важните проблеми на съвременната инфектологията е хронично рецидивиращо форма на херпес инфекция, херпес симплекс вирус 1 и 2. Честотата на пристъпите зависи и спецификации, като качеството на живот на пациента. Въпреки това, степента на повтаряне 6 и повече пъти в годината, с всичките привидно "безобидни" инфекции имат значително влияние върху цялостното здравословно състояние на пациента. Според Регионалния офис на СЗО за Европа определено херпес инфекция в група от заболявания, които определят бъдещите инфекциозни болести в този век.

Както е известно, на проявите на хроничен херпес инфекция са доста специфични и се проявяват чрез единични или групирани балон елементи с серозни съдържание вътре (мехурчета), които се появяват на фона на "увод" - сърбеж и дискомфорт на мястото на бъдещите мехурчета. Обрив има своето динамично развитие: образование в динамиката на балона на земята корички и последващо хиперпигментация. Честотата на обостряне на хронична инфекция зависи от формата на заболяването, както и качеството на живот на пациента. От една обостряне отнема средно 1-2 седмици за възстановяване, съответно, работен капацитет е малко по-ограничен в този период. Често рецидивираща форма на инфекция, се записва при честота на обострянията на най-малко 4, 6 пъти в годината, дори и ако опрощаване периоди последните около 2,5 месеца. В значително отслабване на имунната система, някои пациенти се оплакват от честотата на обострянията, до 15-20 пъти в годината. Разбира се, такива пациенти трябва да се индивидуализира и продължителни схема на лечение с най-новите техники.

Проявите на херпес симплекс

Разработените режими включват антивирусни херпесни инфекции (ацикловир, валацикловир, фамцикловир, и други) и имуномодулиращи (интерферони, индуктори на ендогенен интерферон Immunopreparat други групи) терапия, която ефективно в някакъв етап от болестта. Повечето схеми на лечение, насочени към пропадане на острото заболяване, но не са насочени към дългосрочен ефект. Такова лечение не винаги е достатъчно за постигане на желания резултат - намаляване на повторение до минимум. Определяне на проблема е развитието на резистентност (устойчивост) вируси на антивирусни лекарства, особено използван неконтролируемо и без рецепта. В тази връзка, научноизследователска и развойна дейност са отишли ​​по-далеч. Разработване на лекарства и ваксини терапевтична схема, хроничен херпес инфекция. Но тези методи се оказаха недостатъчни максимална активност. Той дойде ред и на най-новите научни основа на лечение с помощта на специфични дендритни клетки.

дендритни клетки (Дендроцити или DC) се отнасят до клетките на имунната система и представляват специален вид левкоцити с разклонена структура (Dendron дърво, гръцки.). Дендритните клетки имат относително голям размер - до 15-20 м и се намират в почти всички органи и тъкани. Дендритни клетки играят важна роля в имунната система - антиген представящите функция. С други думи, при контакт с микроорганизъм (вирус, бактерии, гъбички и т.н.) в нашето тяло дендритни клетки го абсорбират посредством процес фагоцитоза, и след това го използват антигени за "прегледа" специфичните имунокомпетентни клетки да произвеждат антитела (антиген-специфичен имунен отговор). Дендритните клетки са способни да активират висока мощност имунокомпетентни клетки като CD4 Т-лимфоцити iCD8. Въпреки това, много научни изследвания са показали значително намаляване на дендритни клетки при пациенти с хронично вирусно заболяване, което се счита като една от причините за дългосрочна устойчивост на вируси в човешкото тяло.

дендроцити

Един от най-съвременните методи за лечение на хронично рецидивиращ форма на херпес инфекция се основава на представянето на антиген от дендритни клетки херпес вирус в присъствието на интерферон-алфа и други компоненти [ "Метод за хронична имунотерапия често повтарящи херпес инфекции" патент RU 2485962 базирани FGBI "Научно-изследователски институт по клинична имунология "Сибирски клон на Руската академия на медицинските науки (FGBU "NIIKI" CO памети) Ostanin AA, Старостин Н. М., черен ER].

Целта на този метод е да се осигури дендрична поколение клетъчна нови ваксини, които могат да се реши един проблем - намаляване на клиничните прояви на херпес инфекции и намаляване на честотата на пристъпите до минимум чрез използване на разходно-ефективен метод за имунотерапия на хронично рецидивиращ херпес инфекция. Постигането на тази цел се постига чрез поколение от периферните кръвни моноцити на пациент автоложна интерферон алфа-индуцирана дендритни клетки, натоварени с рекомбинантен антиген на вируса на херпес симплекс в култура ин витро, че пациентът получава 2mya курсове във връзка с получаването на рекомбинантен интерлевкин-2 като адювант (лекарство повишаване на имунната отговори). Това се дължи на IL-2 е Т-клетъчно активиране на, се предотвратява апоптоза (клетъчна смърт) лимфоцити, синтез на дълъг живот цитотоксични Т лимфоцити.

Очакваният резултат от лечението е развитието на целия антиген-специфичен имунен отговор на високо ниво за дълъг период от време.

Показания за лечение

DK-индикация за ваксиниране е хронично херпес инфекция, често рецидивиращи форма при честота на рецидивите на повече от 6 пъти в годината, и след последното повторение интервал от най-малко 2 седмици (което е в ремисия).

Как е лечението на дендритни клетки

Техническото изпълнение на метода е, както следва: Пациентът е хоспитализиран в болница, където се провежда поколение dendrokletok от периферната кръв на пациента. На сутринта 200 мл кръв се вземат флакон с хепарин (1000 U), към която се прибавя zhelatinol разтвор (40 мл) и се инкубират при 370 за 45 минути. Създадена левкоцитна суспензия, която се центрофугира за 20 минути при 1000 об / мин. Утаените клетки се промиват с фосфатно-zabufernym физиологичен разтвор (PBS), нанесен върху плътностен градиент Ficoll-verografin и отново се центрофугира в продължение на 20 минути, но при 3000 об / мин. Събрани мононуклеарни клетки (МНК) се обработват допълнително (промиват два пъти, ресуспендират) за освобождаване МНК в концентрация 3 х 106 / мл, която се инкубира при 370 в продължение на 2 часа (това nezrelyedendrokletki). След това клетките бяха тествани отново допълнителна обработка натоварване интерферон-алфа на 1000 U / мл (Roferon-A, Roche, Shvetsarii), повторно култивиране в продължение на 3 часа. След това, в присъствието на лекарство polioksidony (НПО PetrovaksFarm, Русия) в доза от 2 нг / мл, и има краен узряване на дендритни клетки.

Генериране на DC клетки

По този начин и се получава IFN-DCs (интерферон индуциран дендритни клетки), които след това се зарежда от специфичен рекомбинантен (изкуствено създаден в лабораторията) антиген на вируса на херпес симплекс (HSV 1 GD, НСО "диагностична система" Нисш Новгород) при доза от 5 ug / мл от инкубиране в продължение на 1 час при 370.

Полученият препарат (специфично IFN-DK) при концентрация от 6.0 х 106 / мл cryopreserve за по-нататъшна употреба. целия производствен процес продължава 4 дни.

Техниката на DC ваксинация

Техниката на DC ваксинация използването на този наркотик се състои от 2 курса на ваксина:

1) "индуктор курс" 4-6 включва подкожни инжекции в горната третина на рамото при доза от 5.0 х 106 / мл, на интервали от 2 седмици. Ваксинации се извършват на фона на едновременно прилагане на интерлевкин-2 - препарат "Ronkoleykin®" (OOO "Biotech", Петербург, Русия) в доза от 0.25 мг, който се прилага подкожно като адювант.

инжекции

2) "поддържаща разбира" се състои от 3-6 подкожни инжекции на IFN-DCs в доза от 5 х 106 ml 1 на интервали веднъж месечно едновременно с адювант.

Мониторинг на ефективността на DC ваксинация се извършва от определяне на нивото на пролиферативна реакция към стимулиране на МНК ваксиналния антиген на херпес вирус (HSV 1gD) и митогенът (Con A). Пациентът е взета 10 мл венозна кръв, които се обработват и в продължение на 72 часа, за да се оцени степента на пролиферация и други компоненти на изследването. Резултатите, дадени като средна профил (имп / мин) на три еднакви култури. Контрол се извършва 4 пъти: преди лечението, след 1 година, след втората година и 6 месеца след края на лечението (Едно скорошно проучване 15 месеца след започване на лечението).

лечение Prgnoz

Използвайки този метод, DC-ваксинация с IFN-DCs ваксина показва ефикасност на 75% солна пациенти с често повтарящи форма на херпес инфекция. По този начин, честотата на пристъпите при пациенти е намалял с 3 пъти, и е намален, а общата площ на лезии с продължителност обостряне на ремисия (interrecurrent периоди) се удължава до 3 месеца или повече. Също така е отбелязано подобрение на антиген-специфичен имунен отговор, индуциран след втория курс на ваксиниране, или 6 месеца след лечението.

По този начин, можем да говорим за нов ефективен метод за DC-ваксина, която да стимулира производството на антиген-специфичен имунен отговор не само в периода на ваксина, но след 6 месеца след приключване на лечението, което несъмнено ще се отрази и честотата на рецидиви за дадено заболяване и качеството на живот на пациентите често с хронично рецидивиращо херпесна инфекция.